Научное общество "Клиническая гемостазиология". Диагностика

«ЭКО-МЕД-С»

• Агрегометры «Хроно-лог»
• Приборы для лабораторной
  диагностики
• Компьютерный капилляроскоп

Оборудование для коагулометрии

Агрегометры "Хроно-лог"

Корпорация "Хроно-лог" производит оптические, импендансные и люминесцентные системы для исследования агрегации тромбоцитов и других связанных с ней процессов. Возможен выбор модели агрегометра в котором будут скомбинированы любые два или все три метода детекции. Выпускаются одно-, двух- и четырех- канальные агрегометры.

Импедансные агрегометры корпорации "Хроно-лог" позволяют изучать тромбоцитарную функцию в цельной крови в присутствии других клеток и прежде, чем будут разрушены лабильные модуляторы гемостаза. Микрообъем цельной крови – это все, что необходимо для количественного измерения процесса агрегации и секреции. Эти черты делают импедансные агрегометры "Хроно-лог" уникальным инструментом не только для клинических приложений, но и для научных исследований.

Оптические и импедансные агрегометры применяются для диагностики функции тромбоцитарного звена гемостаза, дифференцировки приобретенных и наследственных нарушений гемостаза, мониторинга эффективности применения ингибиторных и других препаратов, оценки влияния новых лекарственных средств на процесс агрегации, количественного определения активности фактора Виллебранда, оценки жизнеспособности тромбоцитов после переливания крови и др.

Применение люминисцентной технологии значительно расширяет возможности для более глубокого исследования гемостаза и для уточнения диагностики сложных патологий.

ОПТИЧЕСКИЕ АГРЕГОМЕТРЫ

Оптическая агрегометрия используется для исследования процессов агрегации на плазме обогащенной тромбоцитами (PRP), а также для измерения агглютинации латексных частиц и для исследования изменения формы взвешенных частиц. Оптические агрегометры "Хроно-лог" с успехом используются во всем мире уже многие годы, начиная с 1967 г и являются "золотым" стандартом в оптической агрегометрии.

Двойной инфра-красный луч и чувствительный фотодетекторный модуль используется для определения разницы в световом прохождении между плазмой обогащенной и обедненной тромбоцитами.

Нулевой уровень и полная шкала устанавливается автоматически при нажатии одной кнопки. Очень маленькая разница (около 30000 тромбоцитов / мкл) между образцом и обедненной плазмой необходима для правильного измерения .

ИМПЕДАСНЫЕ АГРЕГОМЕТРЫ И ИХ ПРЕИМУЩЕСТВА ПЕРЕД ОПТИЧЕСКИМИ

Цельная кровь, разведенная кровь, плазма обогащенная тромбоцитами, отмытые тромбоциты, отмытые лейкоциты – все эти образцы могут быть измерены с помощью импедансной технологии. Корпорация "Хроно-лог" обладает патентом на применение этого метода.

Регистрируются микротоки, протекающие в специальном электродном блоке, при погружении его в различные образцы. При этом измеряется изменение импеданса системы электродов. Увеличение импеданса прямо пропорциональна тромбоцитарной массе осажденной на специальный электродный блок. Кинетика импеданса позволяет количественно судит о кинетике процесса агрегации. Первоначальный контакт элетродов с образцом приводит к образованию на них монослоя тромбоцитов. Затем при добавлении агонистов и других активных агентов происходит постепенная агрегация тромбоцитов на электродах, которая и приводит к характерным изменениям электрических свойств системы.

Возможности и преимущества метода измерения из цельной крови:

• Отказ от трудоемкого и длительного процесса приготовления плазмы обогащенной и обедненной тромбоцитами.
• Метод позволяет быстро и точно идентифицировать пациентов с предрасположенностью к тромбозам или кровотечениям.
• Метод позволяет провести надежный скрининг функции тромбоцитов в цельной крови непосредственно перед хирургической операцией, что невозможно при работе с плазмой.

Методом электронного импеданса можно проводить измерения агрегации даже там, где оптическая агрегация это сделать не может – в гемолизированных, иктеричных и липемичных образцах. В образцах, где повышенная турбидность интерферирует с процессами агрегации, оптическая (классическая) агрегометрия не может точно определить параметры агрегации, что приводит к неправильным результатам.

Также к неправильным результатам оптическая агрегометрия приводит для пациентов с синдромом гигантских тромбоцитов, где должна учитываться потеря тромбоцитов при центрифугировании. И в этом случае импедансная агрегометрия может быть успешно использована.

Пациентов, клиническая история которых предполагает геморрагические нарушения, очень часто исследуют на наличие нарушений системы свертывания. Проверка дисфункции тромбоцитов зачастую не проводится, так как оптическая агрегометрия требует больших время затрат и при этом может не дать однозначного ответа.

Теперь, из цельной крови, и за время меньшее, чем требуется обычно для приготовления плазмы для коагулограммы, можно определить большинство видов дисфункции тромбоцитов: болезнь Виллебранда, дефекты секреции, дефицит накопления, дефекты рецепторов мембраны и др.

Для выявления болезни Виллебранда, например, ристоцитин-агрегация на основе цельной крови импедансным методом намного более надежна чем длительный процесс измерения vW ко-фактора на фиксированных тромбоцитах. Высокочувствительный импедансный метод позволяет очень быстро и точно провести скрининг пациентов из этой группы риска.

Поскольку импедансная агрегометрия на цельной крови является наиболее адекватным средством для определения гиперагрегации этот метод рекомендуется для исследования пациентов с риском тромбоэмболических осложнений. Этот метод более чувствителен и адекватен по сравнению с оптической агрегацией, поскольку измерения происходит в присутствии всех нативных элементов цельной крови, включая эритроциты и лейкоциты.

Сосудо-расширяющий и антитромботический препарат Dipyridamole значительно ингибирует агрегацию в цельной крови. Это ингибирование не проявляется, однако. в плазме обогащенной тромбоцитами. Взаимодействие между тромбоцитами и эритроцитами играет важную роль в анти-тромбоцитарном действии этого препарата и его аналогов. Это взаимодействие невозможно адекватно оценить проводя обычную оптическую агрегометрию на плазме.

Антагонист рецептора GP IIb/IIIa препарат Abciximab (ReoProTM) ингибирует тромбоцитарную функцию, предотвращая связывание фибриногена и фактора Виллебрандта к тромбоцитам. Импедансная агрегометрия на цельной крови более точно отслеживает процесс блокады рецепторов, позволяя измерить эффект от действия препаратов типа Abciximab быстрее и точнее, чем классическая турбидиметрическая (оптическая) агрегация.

У пациентов с предрасположенностью к тромбозу обычно обнаруживается гиперактивность тромбоцитов. Агрегометры на цельной крови позволяют не только четко определить, где терапия по ингибированию такой гиперфункции необходима, но и быстро проводить мониторинг проводимой терапии, что позволяет своевременно корректировать терапию.

ЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ АГРЕГОМЕТРЫ

Широкий спектр люминисцентных реакций (выброс АДФ, уровень ионизированного кальция, генерация супероксидов и др.) может быть измерен при помощи ультра-чувствительной фотоумножительной трубки, которая испльзуется в люми-агрегометрах корпорации “Хроно-лог”. Люминисценция используется для детекции всех дефектов накопления и секреции. Этот метод также достаточно чувствительный для детекции гепарин-индуцированной тромбопении.

Процессы агрегации в цельной крови наиболее приближены к физиологическим условиям in vivo. Именно поэтому достигается высокая достоверность и специфичность результатов исследования. Эффективность, экономичность и высокая чувствительность предлагаемых методов дает возможность клиницистам не только быстро провести необходимую диагностику, но и обеспечить надежную программу мониторинга проводимой терапии в реальном времени. При люминисцентном измерении одновременно с агрегацией тромбоцитов можно исследовать и другие процессы, например, процессы секреции гранул.

• Клеточный ответ на стимулы инициируется изменением цитоплазматического уровня ионизированного кальция. На люминисцентном кальциевом агрегометре одновременно с измерением агрегации можно одновременно измерять поток ионизированного кальция в образце (для этого используют уникальный люминофор Aequarin люминисценция которого пропорциональна концентрации ионизированного кальция) и наблюдать при этом отклик на различные стимулы. Исследования этим методом дают прямые свидетельства о временной связи между процессами мобилизации ионизированного кальция и степенью полноты клеточного ответа.
• Прямое люминисцентное измерение АДФ секреции в цельной крови дает однозначный ответ о нормальности процесса выброса гранул и позволяет количественно измерить активацию тромбоцитов. Для сравнения, аналогичное измерение при помощи оптического агрегометра на плазме обогащенной тромбоцитами пропускает 67% пациентов с дефектом накопления и угрозой длительных кровотечений. Одновременное измерение реакции высвобождения позволяет глубже понять механизмы тромбоцитарного ответа.
• Люми-агрегометры корпорации "Хроно-лог" могут быть использованы также для изучения лейкоцитарной функции. Лейкоциты агрегируют и генерируют супероксиды в ответ на различные стимулы. Хемилюминисценция, лежащая в основе работы люми-агрегометров, широко известна и обоснованно применяется для определения нейтрофильных дефектов. Например, таких как хронический грануломатоз и миелопероксидазная недостаточность.
• Аспириновые препараты (ASA) используются терапевтически для ингибирования продуцирования тромбоксана циркулирующими тромбоцитами. Мониторинг эффективности уровней дозировки аспирина, одного или в комбинации с препаратом Dipyridamole, может быть проведен по измерению агрегации тромбоцитов с арахидоновой кислотой или с коллагеном в низкой концентрации (1 мкг/мл) и по одновременному измерению тромбоксан-зависимого выброса АДФ.

Успешное применение оптических, импедансных и люминисцентных агрегометров "Хроно-лог" в клинической и научной практике подтверждается сотнями публикаций во всем мире. Накоплен огромный опыт по их использованию.

ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ

Созданный "Хроно-лог" пакет программного обеспечения Aggro/Link позволяет передавать данные из любого агрегометра во внешний компьютер. Программное обеспечение работает в среде Windows и позволяет автоматизировать процесс сбора, обработки и архивации данных, построить калибровочные кривые, провести все вычисления и распечатать результат на принтер. Для удобства анализа графики с разными индукторами выводятся разным цветом. На одной странице клинического отчета могут быть распечатаны до 24 цветных графиков. Возможен экспорт данных в электронные таблицы.

РЕАГЕНТЫ

Корпорация "Хроно-лог" предлагает также весь спектр высококачественных реагентов для проведения различных агрегометрических тестов.

роТЭГ®

Анализатор гемостаза роТЭГ®- это современный 4-х канальный компьютерный тромбоэластограф. При создании анализатора использована новая ротационная технология. Также разработан ряд различных активаторов и модификаторов процесса, которые позволяют эффективно провести дифференциальную диагностику различных нарушений гемостаза.

Анализатор роТЭГ особенно полезен в случаях, когда врачу необходимо быстро принять правильное решение относительно функционального состояния гемостаза пациента, например, перед и после операции и даже во время операции. Один такой тест дает информацию о текущем состоянии всех основных процессах гемостаза - коагуляции, образования фибринового сгустка, ретракции сгустка и фибринолиза.

Следует заметить, что традиционные методы исследования гемостаза оценивают время образования сгустка, но они не дают прямой информации о самом процессе и о качестве образовавшегося сгустка. Ключевой же вопрос острых нарушений гемостаза – это понять, образуется ли достаточный и стабильный сгусток в результате взаимодействия всех плазматических факторов, ингибиторов, тромбоцитов и фибринолитических агентов в цельной крови? Именно роТЭГ позволяет ответить на этот вопрос.

ЧТО ОПРЕДЕЛЯЕТ роТЭГ?

• Оценка функционального состояния всего гемостаза в течение 10-15 мин
• Взаимодействие всех факторов и модуляторов гемостаза в цельной крови
• Механическая стабильность и упругость сгустка
• Кинетика стабилизации сгустка и его растворения
• Гиперфибринолиз (практически не определяем классическими тестами)
• Оценка дейстивия различных лекарств и эффекта разведения
• Оценка действия антикоагулянтов и антифибринолитиков, влияние FXIII

ПРЕИМУЩЕСТВА ПЕРЕД КЛАССИЧЕСКИМ ТЭГом

• Более чувствительная детекция - на основе патентованного метода опто-механического ротационного измерения
• Прямое торсионное измерение эластичности сгустка
• Нечувствительность метода измерения по отношению к вибрациям
• Четыре измерительных канала в одном компактном приборе
• Встроенная электронная пипетка для автоматического старта измерения
• Внешний управляющий компьютер для контроля за всем ходом анализа
• Автоматический расчет всех параметров результата по полученному графику, наличие дополнительных вычислительных возможностей и новых параметров, встроенная помощь в интерпретации данных
• Автоматическая архивация результатов и графиков в памяти компьютера
• Наличие ряда специальных модификаторов и активаторов для проведения дифференциальной диагностики и для существенного сокращения времени теста

ПРИМЕРЫ ГРАФИКОВ

ОСНОВНЫЕ АКТИВАТОРЫ

ЭКСТЭГ (тканевой фактор) - взаимодействие всех факторов и модуляторов в цельной крови

ИНТЭГ (контакт активатор) – плазматическая коагуляция, полимеризация фибрина, функция тромбоцитов, детекция ингибиторов, таких как гепарин, гирудин и др.

АПТЭГ (тканевой фактор+апротонин) – детекция гиперфибиринолиза и оценка эффективности антифибринолитической терапии

ФИБТЭГ (тканевой фактор+GPIIa/IIIb антагонист) – дискриминация вклада функции тромбоцитов и вклада фибрина при помощи блокирования тромбоцитов, детекция нарушений полимеризации фибрина

ГЕПТЭГ (тканевой фактор+гепариназа) – детекция гепарина (и аналогичных антикоагулянтов), детекция нарушений гемостаза на фоне антикоагуляньной терапии

ЭКАТЭГ (экариновый тест) – детекция ингибиторов тромбина, этот тест может быть также использован для измерения экаринового клоттингового времени

НАТЭГ (классическая рекальсификация) – очень чувствительный тест для детекции нарушений коагуляции и контроля за антикоагулянтной терапией

ОСНОВНЫЕ ИЗМЕРЯЕМЫЕ ПАРАМЕТРЫ

CT (время коагуляции) - общая активность коагуляционной системы

CFT (время образования сгустка) и a-угол (начальная скорость оборазования сгустка) – оценка функции тромбоцитов, действия фактора XIII, полимеризации фибрина, активности гепарина

MA (или MCF) – качество сгустка, оценка его механических свойств

LOT (время наступления фибринолиза) – оценка фибринолитической активности l-угол – скорость фибринолиза

Основные области применения

ИССЛЕДОВАНИЯ ГЕМОСТАЗА, ГЕМАТОЛОГИЯ, АКУШЕРСТВО И ГИНЕКОЛОГИЯ, НОВОРОЖДЕННЫЕ, ОНКОЛОГИЯ, ТРАВМА И ОЖОГИ, ТРАНСПЛАНТОЛОГИЯ (особенно печени), СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТАЯ ХИРУРГИЯ, КАРДИОЛОГИЯ

Дополнительные области применения

БАНКИ КРОВИ (для контроля качества тромбоцитарных концетратов), ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ПРОМЫШЛЕННОСТЬ (при оценке эффективности препаратов), ВЕТЕРЕНАРНЫЕ КЛИНИКИ